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電穿孔法轉染如此“萬能”，為什么還要用其他方法？
發(fā)布時間： 2021-10-09 點擊次數(shù)： 2582次同學們在進行轉染時，肯定被各種各樣的轉染試劑挑花了眼吧。商業(yè)化的轉染試劑通常針對多重細胞類型、不同的核酸和各種特定的用途，也就是說，你要從種類繁多的試劑中挑選適合你的。
這時候，電穿孔法轉染就進入了我們的視野。
電穿孔法轉染原理是通過脈沖電場，使得細胞膜上產(chǎn)生小孔，通透性被暫時的提高。周圍的小分子穿過小孔，擴散到細胞內。理論上說，電穿孔法轉染是可以對任何細胞進行轉染，可以轉染DNA、RNA、蛋白、糖類等，也不需要特殊的試劑。
但為什么還是有很多實驗者選擇了脂質體介導法等方案呢？原因如下
1、電穿孔法雖然不需要特殊試劑，但需要購買昂貴的電轉儀。
2、電穿孔法轉染會殺死細胞，因此需要較多的細胞和外源分子。
3、電穿孔法對實驗者的操作水平要求較高。過低的電場強度、過長的電脈沖時間，會裂解細胞；電壓過低，過短的電脈沖時間則會降低轉染效率。
因此，電穿孔法不是真正的“萬能"，實驗上也需要多學習、優(yōu)化。
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