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共轉化，篩選轉染細胞的實用工具
發布時間： 2021-10-11 點擊次數： 1936次想要達到轉染的目的，即分析轉染基因的功能和表達，需要轉染的基因穩定整合進入宿主染色體。
根據細胞類型，細胞群體中，最高有80%的細胞，以瞬時表達的方式表達轉染的基因。但對于穩定轉染，好的情況，也只有1/1000的成功率——細胞能穩定表達轉染的基因。
所以，我們需要通過篩選活的新表型（標記）的細胞，來分離穩定轉染體。方法是將標記的基因和待轉染的基因進行重組、連接，共同轉染到細胞核內。這種物理上沒有關聯的基因整合成1個序列，并在同一轉化細胞內表達的這種現象，叫做共轉化。
那么，篩選具體是如何進行的呢？
一般情況下，這個標記是某種編碼抗生素抗性的基因，和待轉染基因一起在細胞上表達，如第一個在哺乳動物細胞上廣泛使用的篩選基因，編碼胸苷激酶（TK）的病毒基因。
待轉染的細胞系，是不含TK的哺乳動物細胞系，在轉染成功后，才會變成含TK的細胞系，才能在氨基嘌呤存在的培養基中生存。
因此，共轉化是一個篩選細胞的實用方法。
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