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細胞吞噬活動觀察實驗

發(fā)布時間： 2023-01-13　　點擊次數(shù)： 1853次

簡介
高等動物體內(nèi)存在著具有防御功能的吞噬細胞系，它是由單核細胞和粒細胞等白細胞構(gòu)成，是機體內(nèi)免疫系統(tǒng)的重要組成部分。在白細胞中，以粒細胞和單核細胞的吞噬活動較強，故被稱為吞噬細胞。
原理
細胞吞噬活動觀察實驗的基本原理是單核細胞由血液進入組織后逐漸演變成巨噬細胞。巨噬細胞主要靠吞噬作用處理異物；當機體受到細菌等病原體或其他異物入侵時，巨噬細胞首先在趨化因子的作用下向異物移動，然后伸出偽足包裹異物，將異物吞入胞漿內(nèi)形成吞噬泡，隨后溶酶體與吞噬泡融合并消化異物。
材料與儀器
器材：
載玻片、蓋玻片、解剖剪、鑷子、2 ml 注射器、針頭、光學顯微鏡、小白鼠、蟾蜍。
試劑：

① 6％淀粉肉湯（含 0.3％臺盼藍）;

② 1％雞紅細胞懸液

（取雞血 1 ml（肝素抗凝）加入到 99 ml 雞生理鹽水中）;

③小鼠生理鹽水
④雞生理鹽水
⑤蟾蜍生理鹽水
⑥墨汁
步驟
細胞吞噬活動觀察實驗的基本過程可分為如下幾步：
（一）觀察小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬活動
A 實驗前 2 天，每天向小鼠腹腔注射 6％淀粉肉湯 1 ml（起標記作用），以誘導腹腔產(chǎn)生較多的巨噬細胞（此操作由教師在實驗前完成）。
B 實驗時，每組取 1 只經(jīng)上述處理過的小鼠，腹腔注射 1％雞紅細胞懸液 0.5～1 ml（注射時從小鼠下腹外側(cè)進針，呈 45° 角刺入腹腔），然后輕揉小鼠腹部以使細胞懸液分散均勻。
C 30 min 后，再向腹腔內(nèi)注射 0.5 ml 小鼠生理鹽水，輕揉小鼠腹部，使其腹腔液稀釋。
D 3 min 后，頸椎脫位法處死小鼠。
E 用注射器抽取腹腔液（剪開腹腔，把內(nèi)臟推向一側(cè)，用吸管或不裝針頭的注射器吸取腹腔液），滴片，然后蓋上蓋片。
F 鏡下觀察。
（二）觀察蟾蜍白細胞的吞噬活動
A 用注射器吸取蟾蜍生理鹽水稀釋墨汁 0.5～1 ml，注射入蟾蜍尾桿骨兩側(cè)的背淋巴囊內(nèi)，將蟾蜍放在室溫環(huán)境中。
B 約 2～3 h 后，用注射器抽取背淋巴囊內(nèi)的淋巴液，滴在載玻片上，加蓋玻片進行觀察。
注意事項
1 頸椎脫位法處死小鼠：將小鼠放在實驗臺上，右手抓住鼠尾向后拉，左手的拇指和食指向下按住頭部；此時雙手的拇指和食指在顱骨和脊椎間同時向外用力一扽，使顱腦與脊髓分離，從而造成脊髓與腦髓斷離，小鼠會立即死亡。參見圖 4-3。

2 蟾蜍尾桿骨兩側(cè)的背淋巴囊。參見圖 4-4。

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細胞吞噬活動觀察實驗

（一）觀察小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬活動

（二）觀察蟾蜍白細胞的吞噬活動